一、實(shí)驗(yàn)原理
本試劑盒采用間接酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中的人II型膠原蛋白。用純化的抗人II型膠原蛋白抗體包被在酶標(biāo)板上，樣本中的人II型膠原蛋白與已包被的抗體結(jié)合，再加入辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的抗人II型膠原蛋白抗體，形成免疫復(fù)合物。洗板后加入底物顯色，最后加終止液停止反應(yīng)，用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)測(cè)量各孔的OD值。通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)品繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，計(jì)算樣本中人II型膠原蛋白濃度。
二、操作步驟
1. 準(zhǔn)備：確保所有試劑和樣本達(dá)到室溫（20-25℃），準(zhǔn)備好所有試劑和器材。
2. 加樣：在酶標(biāo)板的適當(dāng)位置分別加入標(biāo)準(zhǔn)品和樣本，每孔100μL。
3. 孵育：在37℃孵育1小時(shí)。
4. 洗滌：洗板5次，確保徹底洗凈。
5. 加酶標(biāo)二抗：每孔加入100μL酶標(biāo)二抗，在37℃孵育1小時(shí)。
6. 洗滌：再次洗板5次。
7. 顯色：每孔加入底物溶液，37℃孵育15-30分鐘。
8. 終止：每孔加入終止液，混勻。
9. 測(cè)定：用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)測(cè)量各孔的OD值。
三、注意事項(xiàng)
1. 確保所有試劑和樣本達(dá)到室溫后再進(jìn)行操作。
2. 加樣時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。
3. 孵育和顯色過(guò)程中避免直射陽(yáng)光。

4. 使用前請(qǐng)仔細(xì)閱讀說(shuō)明書(shū)，并按照操作步驟進(jìn)行。

以上是人II型膠原蛋白ELISA試劑盒的操作說(shuō)明，僅供參考，具體操作請(qǐng)根據(jù)試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。如有任何疑問(wèn)或需要更多幫助，請(qǐng)聯(lián)系試劑盒供應(yīng)商或?qū)I(yè)人士。