GV3101（pSoup）電擊感受態(tài)細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

小鼠Flt3配體(mouse Flt3 Ligand)
小鼠纖維連結(jié)蛋白(mous FN)
小鼠Fractalkine（mouse Fractalkine）
小鼠凝血因子X(jué)(mouse FX)
小鼠纖維蛋白原(mouse Fibrinogen)
小鼠Foxp3(mouse Foxp3)
小鼠半乳糖凝集素-9(mouse Galectin-9)
小鼠胃泌素(mouse Gastrin)
小鼠Ghrelin(mouse Ghrelin)
小鼠胰高血糖素樣肽-1(mouse GLP-1)
小鼠胰高血糖素(mouse Glucagon)
小鼠GRO(mouse GRO)
小鼠神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞衍化營(yíng)養(yǎng)因子(mouse GDNF)
小鼠生長(zhǎng)因子(mouse GH)
小鼠心肌轉(zhuǎn)錄因子3(mouse GATA3)
小鼠心肌轉(zhuǎn)錄因子4(mouse GATA4)
小鼠低氧誘導(dǎo)因子1α(mouse HIF-1α)
小鼠熱休克蛋白60(mouse Hsp-60)
小鼠組胺(mouse HIS)
小鼠肝生素(mouse HGF)
小鼠糖化血紅蛋白(mouse HbA1c)