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| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 保存條件 | 低溫冷藏 |
| 品牌 | 莼試 |
| 貨號 | CS-E9632 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 檢測方法 | 詳見說明書 |
| CAS編號 | |
| 保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
| 適應(yīng)物種 | 詳見說明書 |
| 檢測限 | 1.5ng/mL~48ng/mL |
| 數(shù)量 | 20 |
| 包裝規(guī)格 | 詳見說明書 |
| 標(biāo)記物 | 詳見說明書 |
| 純度 | 詳見說明書% |
| 樣本 | 1,25-dihydroxyvitamin D3 |
| 應(yīng)用 | 詳見說明書 |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
公司常年代理eBioscience品牌、Mercodia品牌、Panbio品牌、Alpco品牌、CST品牌、IBL-America品牌、AbFrontier品牌、Calbiotech品牌、Anogen品牌、Ani Biotech品牌、AAT Bioquest品牌、Jaica品牌等elisa試劑盒。
| 產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 檢測范圍 |
| 人1,25-二羥基維生素D3ELISA試劑盒 | 1,25-dihydroxyvitamin D3 | 1.5ng/mL~48ng/mL |
自備物品：
酶標(biāo)儀（450nm）
高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
37℃恒溫箱
自備的設(shè)備及試劑：
1. 450±10nm濾光片的酶標(biāo)儀(建議儀器使用前提前預(yù)熱)
2. 單道或多道微量加液器及吸頭
3. 稀釋樣品的EP管
4. 蒸餾水或去離子水
5. 吸水紙
6. 盛放洗液的容器
試劑盒性能：
準(zhǔn)確性：標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值，大于等于0.9900。
靈敏度：*檢測濃度小于0.1 pg/mL。
特異性：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。
重復(fù)性：板內(nèi)變異系數(shù)小于10%、板間變異系數(shù)小于15%。
貯藏：2-8℃，避光防潮保存。
有效期：6個月
| 雙抗體夾心法(檢測未知抗原) | 間接法(檢測未知抗體) |
1、用緩沖液將抗體稀釋至1-10ug/ml。在反應(yīng)孔中加0.1ml，4℃ 過夜。次日，棄去孔內(nèi)溶液，用洗滌緩沖液洗3次。 2、加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中，置37℃ 孵育1小時。然后洗滌(同時做空白孔，陰性對照孔及陽性對照孔)。 3、加酶標(biāo)抗體：于各反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5～1小時，洗滌。 4、加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鐘。 5、終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml 6、結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽性程度越強(qiáng)，陰性反應(yīng)為無色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號表示。也可測OD值：在ELISA檢測儀上，于450nm(若以ABTS顯色，則410nm)處，以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值，若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍，即為陽性。 | 1、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1-10ug/ml， 每孔加0.1ml，4℃過夜。次日洗滌3次。 2、加樣：加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照) 3、加酶標(biāo)抗體：于反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.05ml，37℃孵育30-60分鐘，洗滌,*一遍用DDW洗滌。 4、加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鐘。 5、終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml 6、結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽性程度越強(qiáng)，陰性反應(yīng)為無色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號表示。也可測OD值：在ELISA檢測儀上，于450nm(若以ABTS顯色，則410nm)處，以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值，若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍，即為陽性。 |
樣品收集、處理及保存方法：
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液：3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
磷酸化活化復(fù)制因子2抗體FP-S ELISA Kit游離蛋白S(FP-S)ELISA試劑盒
磷酸化活化復(fù)制因子2抗體FE3 ELISA Kit游離雌三醇(FE3)ELISA試劑盒
磷酸化活化復(fù)制因子2抗體f-βhCG ELISA Kit游離β絨毛膜激素(f-βhCG)ELISA試劑盒
磷酸化活化復(fù)制因子2抗體Hp-IgG ELISA Kit幽門螺旋菌IgG(Hp-IgG)ELISA試劑盒
磷酸化活化復(fù)制因子2抗體Hp-IgM ELISA Kit幽門螺旋桿菌IgM(Hp-IgM)ELISA試劑盒
活化轉(zhuǎn)錄因子5抗體HP-CagA-IgG ELISA Kit幽門螺桿菌細(xì)胞毒素相關(guān)基因蛋白A-IgG(HP-CagA-IgG)ELISA試劑盒
活化轉(zhuǎn)錄因子6β抗體EL ELISA Kit優(yōu)球蛋白(EL)ELISA試劑盒
AICAR甲?；D(zhuǎn)移酶抗體SOST ELISA Kit硬骨素(SOST)ELISA試劑盒
磷酸化性癥突變蛋白抗體IHH ELISA Kit印度刺猬因子(IHH)ELISA試劑盒
ATP5E蛋白抗體NLRP3/C1orf7/CIAS1/NALP3/PYPAF1 ELISA Kit隱熱蛋白(NLRP3/C1orf7/CIAS1/NALP3/PYPAF1)ELISA試劑盒
ATP5G2蛋白抗體IDO ELISA Kit吲哚胺2,3-雙加氧酶(IDO)ELISA試劑盒
ATP6V0D2蛋白抗體Shh-N ELISA Kit音猬因子N端(Shh-N)ELISA試劑盒
ATP6V1B2蛋白抗體SHH ELISA Kit音猬因子(SHH)ELISA試劑盒
ATPIF1蛋白抗體Inhbb ELISA Kit抑制素β-B(Inhbb)ELISA試劑盒
Attractin蛋白抗體INHBA ELISA Kit抑制素β-A(INHBA)ELISA試劑盒
磷酸化有絲分裂激酶B抗體INH-B ELISA Kit抑制素B(INH-B)ELISA試劑盒
肌動蛋白相關(guān)蛋白M1抗體INH-A ELISA Kit抑制素A(INH-A)ELISA試劑盒
ALKB蛋白抗體INH ELISA Kit抑制素(INH)ELISA試劑盒
乙酰輔酶A酰基轉(zhuǎn)移酶1抗體AP ELISA Kit抑肽酶(AP)ELISA試劑盒
磷酸化β-肌動蛋白抗體OSM ELISA Kit抑瘤素M(OSM)ELISA試劑盒
磷酸化腎上腺素能受體β2/β2-AR 抗體hnRNP R ELISA Kit異質(zhì)性胞核核糖核蛋白R(hnRNP R)ELISA試劑盒
磷酸化腎上腺素能受體β2/β2-AR抗體hnRNP P2 ELISA Kit異質(zhì)性胞核核糖核蛋白P2(hnRNP P2)ELISA試劑盒
載脂蛋白D抗體hnRNP M ELISA Kit異質(zhì)性胞核核糖核蛋白M(hnRNP M)ELISA試劑盒
酸敏感離子通道1抗體hnRNP L ELISA Kit異質(zhì)性胞核核糖核蛋白L(hnRNP L)ELISA試劑盒
雙鏈RNA腺苷酸脫氨基酶抗體hnRNP K ELISA Kit異質(zhì)性胞核核糖核蛋白K(hnRNP K)ELISA試劑盒
髓系、淋巴、混合系易位基因10抗體hnRNP I/PTB ELISA Kit異質(zhì)性胞核核糖核蛋白I(hnRNP I/PTB)ELISA試劑盒
腺苷酸環(huán)化酶1抗體hnRNP H ELISA Kit異質(zhì)性胞核核糖核蛋白H(hnRNP H)ELISA試劑盒
腺瘤樣抗體hnRNP G ELISA Kit異質(zhì)性胞核核糖核蛋白G(hnRNP G)ELISA試劑盒
溶血磷脂酰基轉(zhuǎn)移酶抗體hnRNP E ELISA Kit異質(zhì)性胞核核糖核蛋白E(hnRNP E)ELISA試劑盒
錨蛋白重復(fù)及SAM結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體hnRNP D ELISA Kit異質(zhì)性胞核核糖核蛋白D(hnRNP D)ELISA試劑盒
人1,25-二羥基維生素D3ELISA試劑盒磷酸化間變型激酶抗體hnRNP C ELISA Kit異質(zhì)性胞核核糖核蛋白C(hnRNP C)ELISA試劑盒
?；o酶A脫氫酶很長鏈抗體hnRNP A3 ELISA Kit異質(zhì)性胞核核糖核蛋白A3(hnRNP A3)ELISA試劑盒
信號轉(zhuǎn)導(dǎo)銜接結(jié)合蛋白抗體hnRNP A2/B1 ELISA Kit異質(zhì)性胞核核糖核蛋白A2/B1(hnRNP A2/B1)ELISA試劑盒
操作流程如下：
（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設(shè)3個平行孔；設(shè)兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個空白對照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl?！?/p>
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min?！?/p>
（6）洗板，同（4）?！?/p>
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。
（9）洗板，同（4）。
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min?！?/p>
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)?！?/p>
（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，zui終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。
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