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| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 保存條件 | |
| 品牌 | 莼試 |
| 貨號 | CSX4446 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 組織來源 | 詳見說明書 |
| 細(xì)胞形態(tài) | 球形克隆 |
| 是否是腫瘤細(xì)胞 | 是 |
| CAS編號 | |
| 保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
| 器官來源 | 詳見說明書 |
| 免疫類型 | 詳見說明書 |
| 品系 | 詳見說明書 |
| 生長狀態(tài) | 小鼠胚胎內(nèi)細(xì)胞團(tuán) |
| 物種來源 | 詳見說明書 |
| 包裝規(guī)格 | 詳見說明書 |
| 純度 | 詳見說明書% |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
小鼠胚胎干細(xì)胞CE3（干細(xì)胞庫保藏）培養(yǎng)冷凍保存細(xì)胞之方法：
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
細(xì)胞凍存步驟：
資源名稱 小鼠胚胎干細(xì)胞CE3（干細(xì)胞庫保藏）培養(yǎng)
種屬:CE3
類型:小鼠胚胎內(nèi)細(xì)胞團(tuán)
形態(tài):球形*
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:mES完全培養(yǎng)液配方（600 ml）： DMEM (Invitrogen 12430) 497 ml ES級FBS (biochrom S4115) 90 ml Glutamax (Invitrogen 35050) 6 ml NEAA (Invitrogen 11140) 6 ml LIF (Millipore ESG1107) 60 μl（終濃度為1000U/ml） β-Mer (Invitrogen 21985) 1.5 ml 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度。
細(xì)胞分類：
第一種：
是凍存產(chǎn)品，由氮直液接拿出，干冰運(yùn)輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因?yàn)閺?fù)蘇手法對于細(xì)胞狀態(tài)影響較大，一旦細(xì)胞狀態(tài)不好，很難說是細(xì)胞自身不行，還是復(fù)蘇沒操作好；另外溫度對細(xì)胞、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細(xì)胞儲存的zui好方式，快遞時間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量；干冰運(yùn)輸需要額外添加400元的運(yùn)費(fèi)(順豐)。
第二種：產(chǎn)品僅用于科研
是我們復(fù)蘇好細(xì)胞，QC通過后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運(yùn)輸給客戶，排除復(fù)蘇造成影響，常溫運(yùn)輸也對細(xì)胞影響也不大，只需加25元運(yùn)費(fèi)(順豐)。
質(zhì)量保證：我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進(jìn)口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。
細(xì)胞培養(yǎng)過程：
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。
以下是小鼠胚胎干細(xì)胞CE3（干細(xì)胞庫保藏）培養(yǎng)的相關(guān)熱銷產(chǎn)品：
隱色孔雀石綠（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品Leucomalachite Green rabbitC-ReactiveProtein,CRPELISA試劑盒兔子C反應(yīng)蛋白(CRP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 可溶性CD30配體(sCD30L)ELISA試劑盒 ，英文名： sCD30L ELISA Kit
二十酸甲酯（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：≥98.0%(GC)Methyl Arachidate 小鼠雌激素受體β(ERβ)ELISA試劑盒 ，英文名： ERβ ELISA Kit ratEndothelin1,ET-1ELISA試劑盒大鼠內(nèi)皮素1(ET-1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
反式玉米素質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)trans-Zeatin 人優(yōu)球蛋白(EL)ELISA檢測試劑盒HumanEuglobulinLysis,ELELISAKit 96T/48T HumandipeptidylpeptldaseⅣ,DPPⅣELISA試劑盒人二肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
氯亞鉑酸鉀 質(zhì)量規(guī)格：BR,鉑含量 ≥46%,原始鉑粉度＞99.95% Dipotassium tetrachloroplatinate 大鼠卵泡抑素(FS)試劑盒 Rat Follistatin,FS ELISA Kit HumanHeatShockProtein40，HSP-40ELISAKit人熱休克蛋白40(HSP-40)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠著絲粒蛋白H(CENPH)ELISA試劑盒 ，英文名： CENPH ELISA Kit 異連翹苷規(guī)格 Isoforsythiaside
內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體-3(VEGFR-3)ELISA檢測試劑盒MonkeyVascuoarendothelialcellgrowthfactorreceptor,VEGFR-3ELISAkit 96T/48T 6817-41-0異蓮心堿 Isoliensinine
犬繆勒管抑制物質(zhì)/抗繆勒管激素(MIS/AMH)試劑盒 Canine Mullerian Inhibiting Substance/Ai-Mullerian Hormone,MIS/AMH ELISA Kit 2450-53-5異綠原酸A說明書 Isochlorogenic acid A
英文名稱HumanniicoxidesyhaseELISAKIT人合成酶(NOS)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 14534-61-3異綠原酸B品牌 Isochlorogenic acid B
化微粒體1脂酶D(PhospholipaseD)總活性熒光定量檢測試劑盒20 32451-88-0異綠原酸C規(guī)格 Isochlorogenic acid C
27215-14-1新穿心蓮內(nèi)酯規(guī)格 Neoandrographolide 英文名稱Ratt-PAELISAKit大鼠組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)規(guī)格：96T/48T
27215-14-1新穿心蓮內(nèi)酯規(guī)格 Neoandrographolide 英文名稱Ratt-PAELISAKit大鼠組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)規(guī)格：96T/48T
27210-57-7新丹參酮 miltirone 英文名稱RattotalhemolyticcomplemeELISAKit大鼠總?cè)苎a(bǔ)體(CH50)規(guī)格：96T/48T
27210-57-7丹參新酮說明書 Miltirone 英文名稱RattotalhemolyticcomplemeELISAKit大鼠總?cè)苎a(bǔ)體(CH50)規(guī)格：96T/48T
27208-80-6虎杖苷品牌 Polydatin 英文名稱RatTissuePolypeptideAigenELISAKit大鼠組織多肽抗原(TPA)ELISAKit規(guī)格：96T/48T
小鼠胚胎干細(xì)胞CE3（干細(xì)胞庫保藏）培養(yǎng)小鼠載脂蛋白H(APOH)ELISA試劑盒 ，英文名： APOH ELISA Kit 28831-65-4紫草酸規(guī)格 lithospermic acid
猴可溶性細(xì)胞粘附分子1(sVCAM-1)ELISA檢測試劑盒Monkeysolublevasccularcelladhesionmolecule1,sVCAM-1ELISAKit 96T/48T 81907-62-2靈芝酸A Ganoderic Acid A
犬結(jié)締組織生長因子(CTGF)試劑盒 Canine connective tissue growth factor,CTGF ELISA Kit 33783-82-3HederacolchisideE說明書 Hederacolchiside E
英文名稱HumahrombomodulinELISAKit人調(diào)節(jié)蛋白(TM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 68027-15-64補(bǔ)充中2品牌 hederagenin 3-O-α-L-rhamnopyranosyl(1→2)-(β-D-glucopyranosyl(1→4))-α-L-arabinopyranoside
化線粒體凍存液(酶學(xué)和膜結(jié)構(gòu)保護(hù))50毫升 848784-87-24補(bǔ)充中3規(guī)格 Lup-20(29)-en-28-oic acid, 3-[ D-glucopyranosyl(1→4)[ L-rhamnopyranosyl) (1→2)-L-arabinopyranosyl]oxy], (3,4)-)
收到小鼠胚胎干細(xì)胞CE3（干細(xì)胞庫保藏）培養(yǎng)處理方法
產(chǎn)品僅用于科研1、首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請拍照，并及時與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題，部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。?、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時，若細(xì)胞密度超過80%，可將細(xì)胞懸液分至2個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml；若細(xì)胞密度未超過80%，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時再進(jìn)行傳代操作。
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