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細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程：

產(chǎn)品僅用于科研冷凍保存細(xì)胞之方法：
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞說(shuō)明書(shū)冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí)， 以防止冰晶過(guò)大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

資源名稱　EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞說(shuō)明書(shū)
種屬:KMY0901

形態(tài):淋巴母細(xì)胞樣

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基:RPMI1640(w/oHepes)15%NBS

生長(zhǎng)特性:懸浮生長(zhǎng)

細(xì)胞分類：
第一種：
是凍存產(chǎn)品，由氮直液接拿出，干冰運(yùn)輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因?yàn)閺?fù)蘇手法對(duì)于細(xì)胞狀態(tài)影響較大，一旦細(xì)胞狀態(tài)不好，很難說(shuō)是細(xì)胞自身不行，還是復(fù)蘇沒(méi)操作好；另外溫度對(duì)細(xì)胞、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細(xì)胞儲(chǔ)存的zui好方式，快遞時(shí)間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量；干冰運(yùn)輸需要額外添加400元的運(yùn)費(fèi)(順豐)。
第二種：
是我們復(fù)蘇好細(xì)胞，QC通過(guò)后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運(yùn)輸給客戶，排除復(fù)蘇造成影響，常溫運(yùn)輸也對(duì)細(xì)胞影響也不大，只需加25元運(yùn)費(fèi)(順豐)。
質(zhì)量保證：我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購(gòu)買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè)，100%進(jìn)口來(lái)源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。
細(xì)胞凍存步驟：

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
產(chǎn)品僅用于科研一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號(hào)11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號(hào)16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。

收到EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞說(shuō)明書(shū)處理方法
1、首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請(qǐng)拍照，并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題，部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落；先不要打開(kāi)培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí)，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū)，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸浮）、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過(guò)80%，可正常傳代；若未超過(guò)80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時(shí)，若細(xì)胞密度超過(guò)80%，可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml；若細(xì)胞密度未超過(guò)80%，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作。
以下是EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞說(shuō)明書(shū)的相關(guān)熱銷產(chǎn)品：
硬脂酸鋁Aluminum stearate質(zhì)量規(guī)格：AR  組蛋白H3-K79乙?；瘷z測(cè)試劑盒10/20等  口蹄疫病毒O亞型(FMDV-O)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?/span>) 48T

鉍試劑III(>99%,BR)Bismuth(III) nitrate pentahydrate質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR  Mouseai-Monocyteaibody,AMAELISA試劑盒小鼠抗單核細(xì)胞抗體(AMA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  Humanpeptidylprolylisomerase(cyclophilin)-like1,PPIL1ELISA試劑盒人肽酰脯氨酰異構(gòu)酶(親環(huán)蛋白)樣1(PPIL1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

1酸氫鈣二水(>Calcium phosphate, dibasic, dihydrate質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR  小鼠*再生蛋白Ⅳ(REG4)ELISA試劑盒 ，英文名： REG4 ELISA Kit  ELISAKitDAO豬氧化酶規(guī)格：48T/96T

碳酸鈰Cerium(III) carbonate, hydrate質(zhì)量規(guī)格：>99.9%,AR  兔子Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA檢測(cè)試劑盒rabbitN-terminalprocollagenⅢpropeptide,PⅢNPELISAKit 96T/48T  HumandipeptidylpeptldaseⅣ,DPPⅣELISAKit人二肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
Ratalcoholdehydrogenase,ADHELISAKit大鼠乙醇脫氫酶(ADH)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  133-04-0細(xì)辛脂素   Asarinin

載玻片細(xì)胞αSMA蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20  20183-47-5細(xì)葉遠(yuǎn)志皂苷說(shuō)明書(shū)  Tenuifolin

Mouse5-Nucleotidase,5-ELISA試劑盒小鼠5核苷酸酶(5-)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  51938-32-0夏佛塔苷品牌  Schaftoside

小鼠脂蛋白關(guān)聯(lián)1脂酶A2(LpPLA2)ELISA試劑盒 ，英文名： LpPLA2 ELISA Kit  55576-66-4仙鶴草酚B規(guī)格  Agrimol B

基質(zhì)金屬蛋白酶11(MMP11)ELISA檢測(cè)試劑盒Monkeymaixmetalloproteinase11,MMP11ELISAKit 96T/48T  85643-19-2仙茅苷   Curculigoside
340963-86-2遼東楤木皂苷V   Araloside V   載玻片細(xì)胞CASPASE-7蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20

33889-69-9水飛薊汀   Silicristin   載玻片細(xì)胞CASPASE-5蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20

33889-68-8防己諾林堿規(guī)格  Fangchinoline   載玻片細(xì)胞CASPASE-3蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20

33783-82-3HederacolchisideE說(shuō)明書(shū)  Hederacolchiside E   載玻片細(xì)胞CASPASE-2蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20

33570-04-6白果內(nèi)酯   Bilobalide   載玻片細(xì)胞CASPASE-10蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞說(shuō)明書(shū)小鼠抗凝血酶受體(A)ELISA檢測(cè)試劑盒Mouseai-thrombieceptor,AELISAKit 96T/48T  6559-91-74’-去甲基表鬼臼   4＆#146;-Demethylepipodophyllotoxin

人抗型肝炎病毒抗體(ai-HCV)試劑盒 Human ai-hepatitis C virus(HCV)aibody ELISA Kit  84272-85-55-O-甲基維斯阿米醇苷說(shuō)明書(shū)  5-O-Methylvisammioside

rabbitTissuefactor,TFELISAKit兔子組織因子(TF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  77690-92-76'''-阿魏酰斯皮諾素品牌  6'''Feruloylspinosin

載玻片細(xì)胞CYP1A2蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20  90332-66-47-木糖基-紫杉醇規(guī)格  7-xylosyltaxol

Humanβcatenin,β-CatELISA試劑盒人β連環(huán)蛋白/聯(lián)蛋白(β-Cat)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  521-32-47-去甲基銀杏雙黃酮   Bilobetin