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產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
保存條件 | 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS |
品牌 | 莼試 |
貨號(hào) | CSX4302 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | 詳見說明書 |
細(xì)胞形態(tài) | 淋巴母細(xì)胞樣 |
是否是腫瘤細(xì)胞 | 是 |
CAS編號(hào) | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長(zhǎng)狀態(tài) | 懸浮生長(zhǎng) |
物種來源 | 詳見說明書 |
包裝規(guī)格 | 詳見說明書 |
純度 | 詳見說明書% |
是否進(jìn)口 | 是 |
急性T淋巴細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)冷凍保存細(xì)胞之方法:
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí), 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
細(xì)胞凍存步驟:
資源名稱 急性T淋巴細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)
種屬:TALL-104
形態(tài):淋巴母細(xì)胞樣
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:IMDM:Iscove'sModiefiedDulbecco'sMedium20%FBS
傳代方法:維持細(xì)胞密度在4×105~1×106cells/ml之間,2~3天換液1次
生長(zhǎng)特性:懸浮生長(zhǎng)
存儲(chǔ)條件:基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
細(xì)胞分類:
第一種:
是凍存產(chǎn)品,由氮直液接拿出,干冰運(yùn)輸給客戶。一般不推薦這種,也較少使用這種方式,因?yàn)閺?fù)蘇手法對(duì)于細(xì)胞狀態(tài)影響較大,一旦細(xì)胞狀態(tài)不好,很難說是細(xì)胞自身不行,還是復(fù)蘇沒操作好;另外溫度對(duì)細(xì)胞、基因功能狀態(tài)影響很大,也不是細(xì)胞儲(chǔ)存的zui好方式,快遞時(shí)間也很難控制,多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量;干冰運(yùn)輸需要額外添加400元的運(yùn)費(fèi)(順豐)。
第二種:產(chǎn)品僅用于科研
是我們復(fù)蘇好細(xì)胞,QC通過后,T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運(yùn)輸給客戶,排除復(fù)蘇造成影響,常溫運(yùn)輸也對(duì)細(xì)胞影響也不大,只需加25元運(yùn)費(fèi)(順豐)。
質(zhì)量保證:我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購(gòu)買到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測(cè),100%進(jìn)口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。
細(xì)胞培養(yǎng)過程:
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號(hào)11095-080),85%;北美胎牛血清(United States,GIBCO,貨號(hào)16000-044),15%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%完全培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。
以下是急性T淋巴細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)的相關(guān)熱銷產(chǎn)品:
左西孟旦Levosimendan質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 人幾丁質(zhì)酶1(殼三糖酶)(CHIT1)試劑盒 Human chitinase 1 (chitoiosidase),CHIT1 ELISA kit 人神經(jīng)特異性烯醇化酶(NSE)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
鋅試劑on質(zhì)量規(guī)格:AR Ratbonemorphogeneticproteins,BMPsELISAKit大鼠骨形成蛋白(BMPs)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 小鼠誘導(dǎo)型合成酶(iNOS)試劑盒 Mouse inducible niic oxide syhase,iNOS ELISA KIT
試劑Dithizone質(zhì)量規(guī)格:AR 10倍TPE分子生物級(jí)濃縮緩沖溶液500毫升 牛結(jié)核桿菌(TB)核酸檢測(cè)試劑盒 48T
鎂試劑IMagnesonI質(zhì)量規(guī)格:AR MouseBonemorphogeneticprotein4,BMP-4ELISA試劑盒小鼠骨成型蛋白4(BMP-4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T HumanPolyADPribosepolymerase,PARPELISA試劑盒人多聚ADP核糖聚合酶(PARP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠組織金屬蛋白酶抑制因子2(TIMP2)ELISA試劑盒 ,英文名: TIMP2 ELISA Kit 36052-37-6山姜素規(guī)格 Alpinetin
鴨主要組織相容性復(fù)合體(MHC)ELISA檢測(cè)試劑盒Duckmajorhistocompatibilitycomplex,MHCELISAKit 96T/48T 19309-14-9小豆蔻明 Cardamonin
犬*甘油三酯脂酶(PNLIP)試劑盒 Dog Pancreatic iacylglycerol lipase,PNLIP ELISA kit 24502-78-1乙酰紫草素說明書 Acetylshikonin
英文名稱MouseAβ1-40proteinELISAKit小鼠Aβ1-40蛋白規(guī)格:96T/48T 34157-83-0雷公藤紅素品牌 Celastrol
同酸待測(cè)樣品處理試劑盒20 69659-80-9丹參酮IIA-磺酸鈉規(guī)格 Sulfotanshinone Injection
黃芪總皂苷規(guī)格 Astragaloside 組織尿酸含量直接(TPTZ)比色法定量檢測(cè)試劑盒50
換規(guī)格換規(guī)格品牌 換規(guī)格 組織尿酸含量酶偶聯(lián)比色法定量檢測(cè)試劑盒20
槐角堿說明書 組織尿素比色法定量檢測(cè)試劑盒20
槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖-7-O-β-D-龍膽雙糖苷 Quercetin-3-O-b-D-glucose-7-O-b-D-gentiobiosiden 組織尿激酶型纖維蛋白溶酶原激活劑(uPA)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒20
廣藿香酮規(guī)格 Pogostone 組織尿激酶型纖維蛋白溶酶原激活劑(uPA)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20
急性T淋巴細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)MousesecretoryimmunoglobulinA,sIgAELISAKit小鼠分泌型球蛋白A(sIgA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 芹菜素-7-O-槐糖苷規(guī)格 Apigenin-7-O-β-D-sophoroside
小鼠左右決定因子2(LEFTY2)ELISA試劑盒 ,英文名: LEFTY2 ELISA Kit 7014-39-3新異甘草苷 Neoisoliquiritin
鴨白介素2(IL-2)ELISA檢測(cè)試劑盒DuckIerleukin2,IL-2ELISAkit 96T/48T 23696-85-7突厥烯酮品牌 Damascenone
犬誘導(dǎo)型合成酶(iNOS)試劑盒 Dog inducible niic oxide syhase,iNOS ELISA Kit 5471-51-2覆盆子酮規(guī)格 4-(4-hydroxyphenyl)-2-butanone
英文名稱MouseCXCL12ELISAKit小鼠B-細(xì)胞趨化因子12(CXCL12)規(guī)格:96T/48T 602-41-5硫秋水仙苷 Thiocolchicoside
收到急性T淋巴細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)處理方法
產(chǎn)品僅用于科研1、首先,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請(qǐng)拍照,并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。⒓?xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時(shí),若細(xì)胞密度超過80%,可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml;若細(xì)胞密度未超過80%,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作。